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单克隆抗体定制
服务内容

项目阶段 服务内容 周期
Ⅰ 抗原制备 抗原表位分析、多肽合成、载体蛋白偶联 3 周
Ⅱ 免疫动物 1、3只 Balb/c 小鼠免疫; 8-10周
2、ELISA 检测(融合效价>64000)
Ⅲ  融合与筛选 效价合格后,经客户同意后,进行融合实验: 3-4周
1、选取血清效价最高的小鼠的取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合。
2、有限稀释融合细胞,96 孔板克隆化;
3、HAT 筛选杂交瘤细胞;
4、免疫原检测,检测出抗原阳性 1-10 个阳性细胞,扩大培养至 24 孔板;
5、挑取阳性克隆扩增,微量-80 度冻存细胞(冻存细胞可保存 1 年以上);
注:客户根据自己的 ELISA 检测、功能检测结果,挑选阳性克隆;丢弃其余克隆。如果客户需要保存其余克隆,需要提前沟通,另行约定费用和保存方式。
Ⅳ  细胞亚克隆 根据客户的要求,选取阳性克隆进行亚克隆: 3-5周
1、每个克隆做 96 孔板有限稀释培养,ELISA 筛选阳性亚克隆;
2、阳性克隆扩增,少量-80 度冻存细胞;
3、提供 1ml 杂交瘤细胞上清,供客户进行检测;检测结果请在 20 天内反馈
注:根据客户要求选择 3 个阳性亚克隆,放大至培养,ELISA 再次确认后进行细胞冻存,每个亚克隆冻存 2 管细胞。
Ⅴ腹水制备与纯化 1、客户选取的杂交瘤细胞制备腹水,Protein A/G 纯化腹水,ELISA 检测效价(针对免疫抗原); 2-3周
2、提供 3 株杂交瘤细胞,以及这 3 株细胞的纯化抗体 3-5mg/clone;
Ⅵ 交付产品 1)    3 株单克隆细胞株  
2)   3 个细胞株的纯化抗体(3-5mg/细胞)
3)    实验报告

抗原要求

1、 蛋白抗原:蛋白量>5mg,浓度>1mg/ml, 纯度>85%,分子量>10KDa
2、多肽抗原:多肽量>5mg,纯度>95%
3、 其他类型抗原:咨询

客户提供材料

1、抗原(需我公司制备抗原请咨询相关报价)
2、检测用样品(如阳性组织、细胞等)
3、抗原信息及相关文献(可选)


提交给客户结果

1、实验报告
2、杂交瘤细胞株(3株)、腹水(5~10ml)或纯化后抗体(3-5mg/细胞)

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